ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ്: രീതി തത്വങ്ങളെ

ആഗിരണം നേരിയ കൂടുതൽ രാസ, ജൈവ ദ്രവങ്ങളുടേയും വീണ്ടും വികിരണത്തിന്റെ ഫൊസ്ഫൊരെസ്ചെന്ചെ അല്ലെങ്കിൽ ഫ്ലൂറസൻസ് ഫലമാണ്. തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം നേരിയ ഫ്ലക്സ് ആഗിരണം ചെയ്ത് എമിഷൻ തമ്മിലുള്ള ഇന്റർവെൽ ദൈർഘ്യമാണ്. ഈ പ്രക്രിയകളുടെ ഫ്ലൂറസൻസ്, ഏകദേശം ഒരേ സമയത്ത് ഫൊസ്ഫൊരെസ്ചെന്ചെ നടന്നാൽ - ചില കാലതാമസം.

ചരിത്രപരമായ വിവരങ്ങൾ

1852-ൽ, ബ്രിട്ടീഷ് ശാസ്ത്രജ്ഞൻ സ്റ്റോക്സ്, ആദ്യം ഫ്ലൂറസൻസ് വിവരിച്ച. അവൻ കൊണ്ട് പരീക്ഷണം ഫലമായി ഒരു പുതിയ പദം അവതരിപ്പിച്ചു ഫ്ലൂർസ്പാർ, അൾട്രാവയലറ്റ് കീഴിൽ ചുവന്ന വെളിച്ചം സ്രവിക്കുന്ന. സ്റ്റോക്സ് ഒരു രസകരമായ പ്രതിഭാസം പ്രശസ്ത. ഇത് ളൂറസെന്റ് വികിരണം തരംഗദൈർഘ്യമുള്ള എപ്പോഴും എക്സചിതതിഒന് വെളിച്ചത്തിന്റെ ഒഴുക്ക് വലിയവൻ കാണപ്പെടുന്നത്.

19 നൂറ്റാണ്ടിൽ സിദ്ധാന്ത സ്ഥിരീകരിക്കാൻ നിരവധി പരീക്ഷണങ്ങൾ ഉണ്ടായിട്ടുണ്ട്. അവർ സാമ്പിളുകൾ പലതരം അൾട്രാവയലറ്റ് സ്വാധീനത്തിൽ ഫ്ലുഒരെസ്ചെ എന്നാണ്. വസ്തുക്കൾ ഇടയിൽ, മറ്റു കാര്യങ്ങൾ, പരലുകൾ, മേൻമ, ധാതുക്കൾ, ക്ളോറോഫിൽ, ക്രൂഡ് മരുന്നുകൾ, അജൈവ സംയുക്തങ്ങൾ, വിറ്റാമിനുകൾ, എണ്ണകൾ ഉണ്ടായിരുന്നു. ജൈവ പരിശോധനകൾ വേണ്ടി ചായങ്ങൾ നേരിട്ടുള്ള ഉപയോഗം 1930 ൽ മാത്രം തുടങ്ങി

ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ്: വിവരണം

20-ാം നൂറ്റാണ്ടിലെ പഠനം ആദ്യ പകുതിയിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന വസ്തുക്കൾ ചില ഉയർന്ന വ്യക്തത പ്രദർശിപ്പിച്ചു. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. വ്യത്യസ്ഥമാക്കുന്നു രീതികൾ നേടിയെടുത്ത കൂടാത്ത കഴിഞ്ഞില്ല പ്രകടനം, നന്ദി, ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ് രീതി മെഡിക്കൽ ജൈവ ഗവേഷണ ഒരു അവശ്യ ഉപകരണം മാറിയിരിക്കുന്നു. പോലെതന്നെ പ്രധാനമാണ് ഫലങ്ങൾ പ്രാപിച്ചുശേഷമുള്ളവരോ പദാർത്ഥങ്ങൾ ചെയ്തു.

? ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ് രീതി പ്രയോജനം എന്താണ് ചെയ്യുന്നത്? പുതിയ വസ്തുക്കൾ ഉപയോഗിക്കുന്നത് സാധ്യമായ വളരെ പ്രത്യേക സെൽ സുബ്മിച്രൊസ്ചൊപിച് ഘടകങ്ങളുടെ സെലക്ഷൻ മാറിയിരിക്കുന്നു. ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ് ഒറ്റ തന്മാത്രകളെ തിരിച്ചറിയാൻ കഴിയും. ചായങ്ങൾ വൈവിധ്യമാർന്ന ഒരേസമയം ഒന്നിലധികം ഇനങ്ങൾ തിരിച്ചറിയൽ അനുവദിക്കുക. ഏത്, അതാകട്ടെ, സാമ്പിൾ പ്രത്യേക പ്രോപ്പർട്ടികൾ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു ഉപകരണങ്ങൾ ചെറിയ പരിധി പരിമിതമായ സ്പേഷ്യൽ റെസലൂഷൻ, ഉണ്ടായിരുന്നിട്ടും, ഈ നിലവാരത്തിനു താഴെ തന്മാത്രകളുടെ തിരിച്ചറിയൽ വളരെ സാധ്യമാണ്. അതിനുശേഷം പ്രദർശനവും ഔതൊഫ്ലുഒരെസ്ചെന്ചെ ശേഷം വിവിധ സാമ്പിളുകൾ. ഈ പ്രതിഭാസം വ്യാപകമായി പെത്രൊലൊഗ്യ്, ബോട്ടണി, അർദ്ധചാലകവിഭാഗത്തിന്റെ വ്യവസായം ഉപയോഗിക്കുന്നു.

സവിശേഷതകൾ

മൃഗം ടിഷ്യു അല്ലെങ്കിൽ ലേബല്തന്നെ പലപ്പോഴും സങ്കീർണ്ണമായ അല്ലെങ്കിൽ ദുർബലമായ അല്ലെങ്കിൽ വളരെ ശക്തമായ സമയകാലങ്ങളെക്കുറിച്ച് ഔതൊഫ്ലുഒരെസ്ചെന്ചെ പഠിക്കുക. എന്നാൽ, പഠനങ്ങളിൽ മൂല്യം ഒരു പ്രത്യേക തരംഗദൈർഘ്യമുള്ള ഇങ്ങിനെയൊക്കെ മെറ്റീരിയൽ ഘടകങ്ങള്ക്കായി ആമുഖം കൈവരിക്കുന്നുണ്ട് ആവശ്യമെങ്കിൽ വെളിച്ചം ഒഴുക്ക് തീവ്രത എമിറ്റിങ്. ഫ്ലുഒരൊഛ്രൊമെസ് സ്വതന്ത്രമായി ഘടനകൾ (അല്ലെങ്കിൽ അദൃശ്യമാക്കി) അറ്റാച്ച് കഴിവുള്ള ചായങ്ങൾ പോലെ പ്രവർത്തിക്കും. അങ്ങനെ അവർ ലക്ഷ്യം ഒരു ഉയർന്ന സെലെച്തിവിത്യ്, ക്വാണ്ടം വിളവ് ഉണ്ട്.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ് വ്യാപകമായി സ്വാഭാവികവും സിന്തറ്റിക് ചായങ്ങൾ ആവിർഭാവത്തോടെ മുതൽ ഉപയോഗിച്ചു. അവർ ഉൽസർജ്ജന, എക്സചിതതിഒന് ചില തീവ്രത പ്രൊഫൈലുകൾ കൈവശമാക്കി നിർദ്ദിഷ്ട ജൈവ ടാർഗെറ്റുകൾ ലക്ഷ്യം.

വ്യക്തിഗത തന്മാത്രകൾ തിരിച്ചറിയൽ

പലപ്പോഴും, അനുയോജ്യമായ സാഹചര്യങ്ങളിൽ, ഒരു പ്രത്യേക ഘടകം തിളക്കം രജിസ്റ്റർ ചെയ്യാം. ഇതിനായി, മറ്റു കാര്യങ്ങൾ, അത് അത്യാവശ്യമാണ് ഡിറ്റക്റ്റർ ഓപ്റ്റിക്കൽ പശ്ചാത്തലം ന്യൂറൽ കുറഞ്ഞ ഘോഷം നൽകുക എന്നതാണ്. കാരണം ഫൊതൊബ്ലെഅഛിന്ഗ് 300 ആയിരം വരെ സ്രവിക്കുന്ന കഴിയും പരാജയം ഫ്ലുഒരെസ്ചെഇന് തന്മാത്ര. ഫോട്ടോണുകൾ. പ്രക്രിയയുടെ 20% ശേഖരം കാര്യക്ഷമത സമയത്ത് ഏകദേശം 60 ആയിരം ഒരു തുക അവരെ രജിസ്റ്റർ ചെയ്യാം.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. വിളികൾ ഫൊതൊദിഒദെസ് അല്ലെങ്കിൽ ഇലക്ട്രോണിക് ഗുണനം അടിസ്ഥാനമാക്കി ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ്, ഗവേഷകർ രണ്ടാം വഴി വ്യക്തിഗത തന്മാത്രകളുടെ സ്വഭാവം നിരീക്ഷിക്കാൻ അനുവദിച്ചു, ചില കേസുകളിൽ പോലും മിനിറ്റ്.

സങ്കീർണതയും

ഒപ്റ്റിക്കൽ ശബ്ദം പശ്ചാത്തലം ഒഴിവാക്കൽ അനുകൂലമായി ഒരു കീ പ്രശ്നം. കാരണം ഫിൽട്ടറുകളും ലെൻസുകളുടെ ഡിസൈൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന വസ്തുക്കൾ പല ചില ഔതൊഫ്ലുഒരെസ്ചെന്ചെ കാണിക്കാറുണ്ട് വസ്തുത, ആദ്യഘട്ടങ്ങളിൽ ശാസ്ത്രജ്ഞന്മാരുടെ ശ്രമങ്ങൾ കുറഞ്ഞ ഫ്ലൂറസൻസ് ഇല്ലാതെ ഘടകങ്ങൾ ഉൽപാദനം ഓറിയന്റഡ് ചെയ്തു. എന്നാൽ, തുടർന്നുള്ള പരീക്ഷണങ്ങൾ പുതിയ നിഗമനത്തിൽ നടത്തി. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. പ്രത്യേകിച്ചും, ആന്തരിക പ്രതിഫലനം അടിസ്ഥാനമാക്കി, ആ ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ് കണ്ടെത്തി, അത് ഒരു കുറഞ്ഞ പശ്ചാത്തലത്തിൽ ഉയർന്ന തീവ്രതയിലുള്ള എക്സചിതതിഒന് വെളിച്ചം നേടാൻ അനുവദിക്കുന്നു.

യന്തനിര്മ്മാണം

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. ആന്തരിക പ്രതിഫലനം അടിസ്ഥാനമാക്കി ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ് തത്വങ്ങളെ, എവനെസ്ചെംത് വേവ് അല്ലെങ്കിൽ എവനെസ്ചെംത് ഉപയോഗം ആണ്. വ്യത്യസ്ത കൊണ്ട് മാധ്യമങ്ങൾ തമ്മിലുള്ള അതിർത്തിയിലാണ് സംഭവിക്കുന്നത് അപവർത്തനാങ്കം സൂചികകൾ. ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, വെളിച്ചം ബീം പ്രിസമുപയോഗിച്ച് കടന്നുപോകുന്നത്. ഒരു ഉയർന്ന അപവർത്തനാങ്കം പാരാമീറ്ററുണ്ട്.

കുറഞ്ഞ പരാമീറ്റർ ലായനി അല്ലെങ്കിൽ ഗ്ലാസ് സമീപം ആദർശവും. പ്രകാശം ഒരു കോൽ കൂടുതൽ നിർണ്ണായകമാണ് ഒരു കോണിൽ അത് സംവിധാനം എങ്കിൽ, കോൽ പൂർണമായും ഇന്റർഫേസ് നിന്ന് പ്രതിഫലിക്കുന്നു. ഈ പ്രതിഭാസം, അതാകട്ടെ, തിരകൾ നൊന്പ്രൊപഗതിന്ഗ് കാരണമാകുന്നു. 200 നാനോമീറ്റർ കുറവ് അകലെ കുറഞ്ഞ അപവർത്തനാങ്കം പരാമീറ്റർ ഒരു ഇടത്തരം പ്രവേശിക്കുന്നതും മറ്റ് പറഞ്ഞാൽ, സൃഷ്ടിച്ച വൈദ്യുതകാന്തിക ഫീൽഡ്.

എവനെസ്ചെംത് വേവ് വെളിച്ചം തീവ്രത ഫ്ലുഒരൊഫൊരെസ് ആവേശം മതി തന്നെ. എന്നാൽ, കാരണം വളരെ ചെറിയ ആഴത്തിൽ, അതിന്റെ അളവ് വളരെ ചെറിയ ആയിരിക്കും. ഫലം ഒരു ലോ-ലവൽ പശ്ചാത്തലം ആണ്.

മാറ്റംവരുത്തല്

ഫ്ലൂറസൻസ് മിച്രൊസ്ചൊപ്യ് ആന്തരിക പ്രതിഫലനം അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ്, എപി-ദീപക്കാഴ്ച നടപ്പാക്കുമെന്ന് കഴിയും. ഈ ഉയർന്ന സംഖ്യാപരമായ അപ്പെർച്ചർ (കുറഞ്ഞത് 1.4, എന്നാൽ അത് 1.45-1.6 എത്തി അഭികാമ്യമാണ്), ഭാഗികമായി ഭൗമോപരിതലത്തിലെ ഫീൽഡ് അങ്ങോട്ട് ലെൻസുകൾ ആവശ്യമാണ്. പിന്നത്തെ ഒരു ചെറിയ സ്പോട്ട് വലിപ്പം കൈവരിക്കുന്നു. സ്ട്രീം ഒരു ഭാഗം തടഞ്ഞു ഒരു നേർത്ത മോതിരം, ഉപയോഗിച്ച് വലിയ സമാനതയും വേണ്ടി. മൊത്തം പ്രതിഫലനം നടക്കാത്ത ശേഷം നിർണായക ആംഗിൾ, ഞങ്ങൾ ലെൻസ് മുങ്ങി ഇടത്തരം മൈക്രോസ്കോപ്പ് കവർ ഗ്ലാസ് അപവർത്തനം ഉയർന്ന ആവശ്യമാണ്.